论 著
PCR和DNP标记核酸探针检测禽源沙门氏菌
四环素耐药性基因tetC的研究
张正庆,罗 薇,刘亚刚,于学辉,傅安静,黄 兴
【摘要】 目的 观察利用PCR和DNP标记核酸探针检测禽源沙门氏菌四环素耐药性基因tetC.方法 通过对临床
分离并经生化实验和血清学试验鉴定的11株禽源沙门氏菌和1株标准株C79-13进行药敏试验.结果 有11株有高耐药
性,另外1株有低耐药性,耐药率达100%;对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,
与药敏试验符合率为100%;用DNP标记其PCR产物,制成DNA探针,采用菌落杂交方法对12株沙门氏菌菌落进行杂交.
结果显示:与PCR结果的阳性符合率为90.2%,具有很高的特异性.结论 利用PCR和用DNP标记的这种探针检测四环
素耐药基因tetC具有很高的敏感性和特异性,从而为禽类沙门氏菌的耐药性检测提供了高效敏感的手段.
【关键词】 沙门氏菌;四环素耐药基因;TetC;PCR;核酸探针
【中图分类号】 R446.6 【文献标识码】 A 【文章编号】 1680-077X(2006)11-1156-03
Studyondetectionoftetracyclineresistancegene(tetC)ofavianpathogenic
SalmonellabyPCRandDNPlabelednucleicacidprobe
ZHANGZheng-Qing,LUOWei,LIUYa-Gang,etal.CollegeofLifeScienceandTechnology,SouthwestU
niversityforNationalities,Chengdu610041,China
【Abstract】 Objective Byusingclinicalisolatesandbiochemicalandserologictestsdetectionon11avian
SalmonellastrainsandonestandardSalmonellaC19-13,thedrug-susceptibilitytestshowsthat:11strainsare
withhighresistance,another1islow.Methods Results Thedrug-susceptibilitytestsalsoshowsthatthe
rateis100%.Afteramplifyingthetetracycline-resistancegene,itproducesspecificmaterialbyplasmidscom
pleteandtheconcordanceratetodrug-susceptibilitytestis100%.ByusingthemethodofprobingthetetC
genelabeledwithDNPandusecolonyhybridizationto12strains,themethodofPRCshowed90.2%concord
anceinpositiverateandwithhighspeciality.Conclusion TheresultindicatesthattheprobeoftetCgenewith
PCRtodetecttetracycline-resistantgenehasthecharacterofsusceptibilityandspeciality.Thepaperwillpro
videseffectiveandexactmethodstodetectthedrug-resistanceofavianSalmonella.
【Keywords】 Salmonella;tetracycline-resistantgene;tetC;PCR;nucleicacidprobe
饲料中添加四环素类药物和临床上大量滥用四环素类
药物,被认为是引起病原菌的耐药性大量产生的原因[1].
四环素类药物早在20世纪60～70年代就已广泛应用,尤
其在兽医的临床上更是如此,所以导致细菌对四环素类的
耐药性颇为严重,我国的情况更是如此.抗生素的选择性
压力,外源性耐药质粒的获得,耐药质粒及转座子在肠道菌
间的传递等是耐药菌株产生和不断增多的主要原因,四环

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